Skip to main content

Cysteine-rich secretory protein 3 (CRISP-3) - a novel protein in human neutrophilic granulocytes

Lene Udby: Forf.s adresse: Granulocytlaboratoriet afsnit 9322, Hæmatologisk Klinik, H:S Rigshospitalet, Blegdamsvej 9, 2100 København Ø. E-mail: l.udby@rh.dk Forsvaret fandt sted den 18. juni 2003. Bedømmere: Niels Ødum, Jan Palmblad, Sverige og Urban Gullberg, Sverige. Vejledere: Lars Kjeldsen og Niels Borregaard.

1. nov. 2005
2 min.

Ph.d.-afhandlingen er baseret på undersøgelser foretaget på Granulocytlaboratoriet, Hæmatologisk Afdeling, H:S Rigshospitalet, i perioden 1999-2002. Der indgår tre studier, hvoraf to er publicerede.

Formålet med projektet var at undersøge et nyt protein med navnet cysteine-rich secretory protein 3 (CRISP-3), som oprindelig blev beskrevet i neutrofile granulocytter i 1996. Polyklonale antistoffer blev rejst mod en rekombinant, trunkeret form af CRISP-3 og en sensitiv, specifik og reproducerbar ELISA blev etableret. CRISP-3 blev vist at findes i en glykosyleret og en ikke-glykosyleret form i neutrofile granulocytter, plasma og eksokrine sekreter.

Den subcellulære lokalisation af CRISP-3 i neutrofile granulocytter blev undersøgt ved subcellulær fraktionering af hvilende og aktiverede neutrofile granulocytter på tre-lags Percoll gradienter, ved studier af mobiliseringen af granulaproteiner ved forskellige stimuli, samt ved dobbeltmærknings-immunguld-elektronmikroskopi. CRISP-3 fandtes at være et matriksprotein i både specifikke granula og gelatinase-granula.

I modsætning til andre neutrofile granulaproteiner var koncentrationen af CRISP-3 i plasma meget høj i forhold til mængden i cirkulerende neutrofile granulocytter. Dette blev undersøgt ved gelfiltrering og immunpræcipitering af plasmaproteiner. Det viste sig, at CRISP-3 danner komplekser med et andet plasmaprotein, som ved massespektrometri blev identificeret som α -1-B glycoprotein.

Tilstedeværelsen af CRISP-3 i neutrofile granulocytter og eksokrine sekreter samt ligheden med pathogenesis-related proteins i planter tyder på en rolle i den medfødte immunitet. Nylige publikationer indikerer også at CRISP-3 har betydning ved inflammatoriske og maligne sygdomme.