Skip to main content

Karakterisering af myogene stamceller med henblik på intervention

Cand.scient. Stine Juhl Petersson: Forf.s adresse: Afdeling for Klinisk Patologi, Odense Universitetshospital, J.B. Winsløwsvej 15, 3., DK-5000 Odense C. E-mail: sjuhl@health.sdu.dk Forsvaret fandt sted den 22. oktober 2008. Bedømmere: Poul Maddox-Hyttel, Thomas Sejersen og Uffe Holmskov. Vejledere: Henrik Daa Schrøder og Charlotte Harken Jensen.

24. okt. 2008
2 min.

Denne ph.d-afhandling fra Det Sundhedsvidenskabelige Fakultet, Syddansk Universitet, er udført på Afdeling for Klinisk Patologi, Odense Universitetshospital. Formålet var forskning i behandlingsstrategier for muskelsvind, fra embryonal stamcellebehandling over evaluering af effekten af steroidbehandling i Duchennes muskeldystropfi (DMD) i en klinisk sammenhæng til arbejde med proteinet secreted protein acidic and rich in cysteine (SPARC) som en potentiel kandidat i genterapi.

Sygdomme i muskelapparatet kan føre til tab af muskelmasse og motoriske funktioner samt tidlig død. DMD er den hyppigst forekommende arvelige neuromuskulære tilstand, den ses hos en ud af 3.500 nyfødte drenge, og er fortsat uhelbredelig.

I et præliminært studie blev genekspressionsniveauet i normale skeletmuskler og i muskler fra fire DMD-patienter før og under behandling med glukokortikoid analyseret. Der blev undersøgt for ændringer i ekspression af muskeldegenerations- og regenerationsassocierede gener. Resultaterne viste betragtelig variation i den relative ekspression inden for gruppen af kontrolpersoner samt forskel mellem patienter og kontrolpersoner inden for en række muskelrelaterede gener. En »score« blev udviklet til måling af glukortikoidinduceret normalisering af ekspressionen mod kontrolniveauet.

Humane embryonale stamceller (hESC) er potentielle kilder til muskelregeneration, hvis muskelstamcellepuljen er udtømt. Efter fundet af myogene markører i sferoider (EBs) blev det undersøgt, om myogene celler kunne dirigere de embryonale stamceller til muskeldifferentiering ved dyrkning af humane EBs i kokultur med en murin muskelcellelinje. Resultaterne viste dannelsen af muskelfibre af delvis human oprindelse med produktion af muskel- og humanspecifikke markører. Myogen induktion var afhængig af direkte kontakt med levende murine/humane muskelceller.

SPARC er et matricellulært protein, der indgår i moduleringen af celle-matrix-interaktioner. Resultaterne viste udtryk under human embryonal udvikling og i adskillige humane myopatier. Derfor blev SPARC's rolle i regenerationen af musemuskulatur undersøgt. Resultaterne viste en opregulering i den regenererende muskulatur med korrelation med ekspressionen af muskelregulatoriske faktorer på ribonukleinsyreniveau, hvilket kunne indikere en specifik muskelregenerativ funktion af SPARC. Transfektion af SPARC i C2C12-celler resulterede i ændret fænotype med udtryk af fibroblastmarkør. SPARC kunne derfor være en mulig modulator af det myogene miljø og spille en potentiel rolle i dannelsen af arvæv/fibrose under muskelreparation. De opnåede resultater i denne afhandling illustrerer vigtigheden af forskellige indgangsvinkler i tilgangen til behandlingsstrategier ved muskeldystrofi/muskelsvind.