Skip to main content

Kvantitativ analyse af specifikke neuron- og gliacellepopulationer i neocortex hos mennesket og musen

Humanbiolog Lise Lyck: Forf.s adresse: Medicinsk Bioteknologisk Center, Institut for Medicinsk Biologi, Syddansk Universitet, J.B. Winsløwsvej 25, 2., DK- 5000 Odense C. E-mail: llyck@health.sdu.dk Forsvaret fandt sted den 3. september 2007. Bedømmere: Professor Wolfgang Brück, Tyskland, professor Andreas Wree, Tyskland, og Anne Katrin Sjølie. Vejledere: Bente Finsen, Henrik Daa Schrøder, Hans Jørgen G. Gundersen og Bente Pakkenberg.

10. sep. 2007
2 min.

Ph.d.-afhandlingen udgår fra Medicinsk Bioteknologisk Center, Institut for Medicinsk Biologi ved Syddansk Universitet i Odense, og er baseret på to artikler og to indsendte manuskripter. Ph.d.-projektet er udført i perioden marts 2002 til april 2007 i samarbejde med Institut for Klinisk Forskning ved Syddansk Universitet, Stereologisk Forskningslaboratorium ved Aarhus Universitet og Forskningslaboratoriet for Stereologi og Neurovidenskab på Bispebjerg Hospital.

Siden introduktionen af de stereologiske metoder i neurovidenskaben i 1980'erne har basalvidenskabelige analyser af hjernens strukturer og celletyper belyst de anatomiske konsekvenser af og årsager til hjernesygdomme. På grund af tekniske vanskeligheder med at kombinere stereologisk celletælling med metoder til visualisering af cellespecifikke markører, har stereologisk analyse af hjernebarkens cellepopulationer hidtil været begrænset til brug af morfologiske kriterier til klassifikation af celletyperne.

Formålet med ph.d.-projektet var 1) at etablere og applicere metoder til stereologisk kvantitativ analyse af specifikke subpopulationer af nerve- og gliaceller i menneskets hjernebark og 2) at anvende stereologisk kvantitativ analyse af specifikke nerve- og gliacellepopulationer til at studere den postnatale udvikling af hjernebarken i mus. Således blev et panel af immunhistokemiske metoder til farvning af nerve- og gliaceller i humant hjernevæv etableret, og farveprotokollerne blev optimeret til farvning af frit flydende 50-80 μm tykke vævssnit for at tillade tælling af celler ved hjælp af den optiske disector. For at imødekomme immunfarvningernes krav til vævspræparation blev der udviklet et nyt stereologisk design for prøveudtagning med en empirisk bestemmelse af de statistiske egenskaber for proceduren fra udskæring af væv til tælling af celler. Endelig blev antallet af nerveceller, myelin-dannende celler og microglia i den menneskelige hjernebark for første gang bestemt ved kombinationen af immunhistokemi og stereologi. I et studie af den postnatale udvikling af hjernebarken i mus viste stereologisk tælling af specifikke cellepopulationer en fortsat rekruttering af nerveceller til neocortex op til to uger efter fødselen og indikerer, at modningen af hjernebarken i mus måske er mere forskellig fra menneskets og strækker sig over en længere periode end hidtil antaget.

Resultaterne af ph.d.-projektet illustrerer de stereologiske metoders styrke til påvisning af cellulære og histologiske forandringer i komplekse strukturer som hjernebarken, og arbejdet i denne afhandling vil kunne anvendes i den videre udforskning af hjernebarkens udvikling og neurologiske sygdomme i mennesket og i dyremodeller herfor.