Akademisk afhandling
Molecular genetic basis and diagnosis of familial hypercholesterolemia in Denmark
2. nov. 2005
2 min.
Doktorafhandlingen består af ti originalartikler og en sammenfattende redegørelse. Undersøgelserne er udført ved medicinsk-kardiologisk afdeling A, Århus Amtssygehus og molekylær medicinsk forskningsenhed, Skejby Sygehus, 1991-1996.
Leverens lavdensitetslipoprotein (LDL)-receptorer regulerer koncentrationen af serum-LDL-kolesterol ved at internalisere lipoproteiner indeholdende apolipoprotein B-100 og apolipoprotein E via receptormedieret endocytose. Mutationer i LDL-receptor (LDLR)-genet forårsager en af de hyppigste klassiske autosomaldominante arvelige sygdomme, familiær hyperkolesterolæmi (FH). Den estimerede prævalens af heterozygot FH er 1:500 i de fleste befolkninger inklusive den danske, hvorimod homozygot FH er meget sjælden, 1:1.000.000. Formålet med studierne har været at undersøge den molekylærgenetiske baggrund og diagnostik af FH i Danmark.
Vi har vist, at polymerasekædereaktion enkeltstrenget konformationspolymorfi (PCR-SSCP)-analyse er en meget effektiv og sensitiv teknik til at detektere ukendte mutationer i LDLR-genet med efterfølgende DNA-sekventering af exons med ændrede SSCP-mønstre. Kendte LDLR-mutationer kan identificeres med relativt enkle specifikke PCR-baserede metoder. Southern blot -analyse og/eller XL-PCR-analyse er nødvendige til identifikation af større LDLR-genrearrangementer.
I Danmark har vi identificeret 60 forskellige mutationer i LDLR-genet med et spektrum, der er intermediært mellem specifikke founder -befolkninger og de fleste europæiske befolkninger, med fem hyppige mutationer (W23X, W66G, W556S, 313+1G→A, 1846-1G→A), der udgør omkring 40-50% af FH.
Større LDLR-rearrangementer, frame-shift og nonsense -mutationer er umiddelbart patogene, men vores undersøgelser har vist, at fuld patogenicitet ikke bør tilskrives missense og splice -mutationer samt mindre deletioner, uden at der er lavet in vitro-genekspression og/eller mRNA-analyse.
Den kumulerede LDL-kolesteroleksposition, hovedsageligt forårsaget af defekte LDL-receptorer, spiller en afgørende rolle for de kliniske manifestationer af FH: et betydelig forhøjet serum-LDL-kolesterol, senexantomer og en markant øget risiko for udvikling af præmatur iskæmisk hjertesygdom (IHS).
Undersøgelserne illusterer tydeligt, at molekylærgenetisk diagnostik styrker en til tider usikker klinisk diagnose af heterozygot FH. Dermed sikres præcis diagnostik og opsporing i familierne, hvilket giver mulighed for iværksættelse af medicinsk kolesterolsænkende behandling som forebyggelse af udvikling af IHS.
Denne samlede molekylærgenetiske viden om FH i Danmark udgør fundamentet for implementering og brug af molekylærgenetisk diagnostik af FH i daglig klinisk praksis.
Forf.s adresse: Hjertemedicinsk afdeling B, Skejby Sygehus, 8200 Århus N.
E-mail: hkjensen@dadlnet.dk
Forsvaret finder sted den 14. juni 2002, kl. 14.00, Auditorium 424, Anatomisk Institut, Aarhus Universitet, Århus.
Bedømmere: Trond P. Leren , Norge, Niels Erik Petersen og Torben Falck Ørntoft.