Påvisning af kokoppevirus (cowpoxvirus) i Danmark

Kokoppevirus (cowpoxvirus ) er et med variolavirus tæt beslægtet virus, hvis egentlige værtsdyr er gnavere såsom mus og rotter. Infektionen kan overføres til en lang række dyrearter inklusive mennesket, og symptomerne er oftest lokaliseret til indgangsporte igennem huden med et mildt forløb og ringe mortalitet [1]. Der er rapporteret om kokoppevirus i Sverige [2] og Norge [3], men den er ikke tidligere blevet påvist i Danmark. For en oversigt se [4].

Sygehistorie

En 13-årig dreng blev henvist pga. mistanke om et perianalt herpesvirusulcus. Patienten havde i 2-3 uger haft et knoppet udslæt og forudgående en længere periode med kløe perianalt. Angiveligt havde patienten tabt sig 4 kg i de seneste tre uger. Objektivt sås der udtalt sårdannelse perianalt (Figur 1 ). Medialt på højre nateshalvdel fandtes tre plateauagtige, eleverede elementer, der målte op til 10 mm i diameter. To lignende elementer sås på henholdsvis venstre nateshalvdel og proksimalt/medialt på venstre femur. Dorsalt på penis sås et godt 10 mm stort element med nogen rødme omkring. Der observeredes ingen udtalt adenitis inguinalis. Ved lysmikroskopi på en stansebiopsi fra et element på venstre femur sås en uregelmæssig akantonisk epidermis med vakuolisering af superficielle epitelceller og i et område infarcering. I den papillære og subpapillære del af corium - stedvis nående den dybere del - fandtes en massiv inflammatorisk reaktion generelt domineret af T-lymfocytter, overvejende T-suppressorceller og histiocytære celler. Mod epitelet sås et stigende antal neutrofile granulocytter og diapedese af cellerne op i epitelet. Der sås ingen karproliferation, men udtalt papillært ødem og eksocytose af erytrocytter, hvilket også observeredes i epitelet stedvis imiterende inklusionslegemer.

Patienten var ca. fem uger før henvisningen vendt hjem fra et tougers ferieophold i Italien, hvor der efter badning over dele af kroppen blev observeret et nældefeberagtigt udslæt, som forsvandt efter en time. Patienten havde tæt kontakt til katte og havde således fået to kattekillinger efter hjemkomsten fra ferien i Italien.

På mistanke om Milkers nodule, orf eller molluscum contagiosum blev der udtaget stansebiopsi fra elementet på venstre femur til virologisk undersøgelse. Elektronmikroskopi (EM) på biopsien viste de for orthopoxvirus typiske murstensformede ca. 225 nm × 300 nm store partikler med et irregulært mønster af tubuli på envelopeoverfladen. Parapoxvirus adskiller sig morfologisk fra andre koppevirus ved at have en mere oval form og en regelmæssig, spindelagtig organisering af tubuli på envelopeoverfladen , og parapoxvirus kunne dermed udelukkes. Biopsimaterialet blev podet på primære kalvenyrecellekulturer, og cytopatogeneffekt blev observeret efter fem dage. I prøver fra disse kulturer kunne koppevirus ligeledes påvises ved EM.

På biopsimaterialet blev der udført en pan-othopoxvirus polymerasekædereaktion (PCR)-analyse ved anvendelse af primerne 5'-ACATGCATGCCAGGAC-3' og 5'-ACCATTACAAACATTATCC-3' under betingelser, der i alt væsentligt var som angivet af Loparev et al [5], hvilket gav et produkt på ca. 1.300 basepar. PCR-produktet blev sekventeret, og den 1.258 basepar kodende region for genet cytokin response modifier B (crmB) blev sammenlignet med repræsentanter for familierne inden for genus Orthopoxvirus jf. Loparev et al [5]. Sammenligningen identificerede entydigt det pågældende virus som et kokoppevirus, og det betegnedes CoPV/DEN/98. Den fylogenetiske placering er angivet i [4].

Tre uger efter henvisningen resterede et enkelt element, men væskedannelsen var ophørt, og de perianale sår var lægt.

Diskussion

Påvisningen af kokoppevirus fra det afficerede hudområde må betragtes som ætiologisk konklusiv på trods af, at bakteriologiske og virologiske laboratorieundersøgelser til udelukkelse af differentialdiagnoser ikke blev foretaget. Det må antages, at affektionens lokalitet skyldes autoinokulation via hænderne, men symptomer på hænderne eller andre dele af kroppen blev ikke observeret.

Beskrivelsen af et generaliseret udslæt efter badning under et ferieophold i Italien formodes at være uden sammenhæng med kokoppeinfektionen, hvorimod den tætte kontakt med katte kan være en forklaring. Der foreligger imidlertid ingen informationer om symptomer på kattene, og nogen konklusion om smittekilden kan derfor ikke nås.

Laurids Siig Christensen , Danmarks Fødevareforskning, Afdeling for Virologi, Lindholm, DK-4771 Kalvehave. E-mail: lsi@dfvf.dk

Antaget: 25. oktober 2004

Interessekonflikter: Ingen angivet

Taksigelser: Laboratoriefuldmægtig Preben Normann og laboratoriefuldmægtig Anita Bagge Hemmingsen takkes for excellent teknisk bistand i laboratoriet. Organisationen Dansk Kvæg takkes for økonomisk støtte til projektet.

Den tilvejebragte sekvens af det påviste isolat af kokoppevirus, CoPV/DEN/98, er deponeret i GenBank under accessionnummer AY623479.

1. Baxby D, Bennett M, Getty B. Human cowpox 1969-93: a review based on 54 cases. Br J Dermatol 1994;131:598-607.
2. Cronqvist J, Ekdal K, Kjartansdottir A et al. Cowpox - en kattsjuka hos människa. Läkartidningen 1991;88:2605-6.
3. Tryland M, Sandvik T, Hansen H et al. Characteristics of four cowpoxvirus isolates from Norway and Sweden. APMIS 1998;106:623-35.
4. Christensen LS, Hornsleth AK. Kokoppevirus: en relevant ætiologi i Danmark? Ugeskr Læger 2005;167:1623-4 .
5. Loparev VL, Massung RF, Esposito JJ et al. Detection and differentiation of old world orthopoxviruses: restriction fragment length polymorphism of the crmB gene. J Clin Microbiol 2001;39:94-100.