Skip to main content
Akademisk afhandling

Culture of human mast cells - the influence of progenitor source and culture conditions

Læge Hanne Busk Andersen: FORF.S adresse: Hanne Busk Andersen, A Forsknings Laboratorium, Pædiatrisk afdeling A, Århus Universitetshospital, Skejby. E-MAIL: hanne.busk.andersen@ki.au.dk. FORSVARET FANDT STED: den 16. juni 2009. BEDØMMERE: Per Stahl Skov, Lars Poulsen og Uffe Birk Jensen. VEJLEDERE: Peter Oluf Schiøtz, professor Hans Jürgen Hoffmann og Christine Dahl.

10. aug. 2009
2 min.

Ph.-d.-afhandlingen er udarbejdet på Pædiatrisk Afdeling A, Århus Universitetshospital, Skejby.

Mastceller (MC) modnes i bindevævet fra knoglemarvs deriverede progenitorer. MC-studier har været påvirket af den svære adgang til at isolere intakte mastceller fra vitalt bindevæv, hvorfor mange videnskabelige grupper gennem de seneste 20 år har udarbejdet dyrkningsmetoder baseret på differentiering af forskellige progenitorer. Variationer i en række forskellige MC-karakteristika er blevet påvist for sådanne celler. Hvorvidt dette skyldes forskelle i dyrkningsbetingelser eller anvendelsen af forskellige MC-progenitorer har været uvist.

Vi undersøgte derfor betydningen af basale dyrkningsbetingelser (dyrkningsperiodens længde, celledensitet, progenitorvalg, medieskift og -sensibilisering med immunglobulin E (IgE)). De fleste af de undersøgte parametre havde indflydelse enten på MC fænotype eller -funktion eller begge, og dette foranledigede til en mere systematisk sammenligning af MC etableret fra perifert blod eller navlestrengsblod dyrket efter samme protokol. MC dyrket fra CD133+ progenitorer isoleret fra navlestrengsblod (CBMC) eller perifært blod (PBMC) blev sammenlignet. MC var metakromatiske og tryptase+, uanset progenitoroprindelse. Ved flowcytometri fandtes mean fluorescence intensity (MFI) at være signifikant højere på CBMC for c-kit (mastcelle- og stamcellemarkør) end på PBMC, mens MFI for CD203c (aktiveringsmarkør) og Fcε RI (high affinity receptor for IgE) var signifikant højest på PBMC. I forhold til CBMC indeholdt og frigav PBMC signifikant mere histamin og prostaglandin D2 (PGD2) efter krydsbinding af Fcε RI, hvilket tyder på en højere grad af reaktivitet og modenhed end CBMC. Dyrkning med interleukin-4-modnede også PBMC i højere grad end CBMC. Udbyttet af MC fandtes at være overlegent ved dyrkning af progenitorer deriveret fra navlesnorsblod end fra perifert blod. Progenitorer fra navlestrengsblod og perifert blod kan altså udvikles til MC med forskellige karakteristika.

Da mastceller er påvist at være involveret i mange forskellige sygdomme, er yderligere studier af progenitorers epigenetiske forskelle derfor nødvendlige for at forstå, hvorledes man bedst differentierer stamceller imod in vitro-mastceller, der ligner in vivo-mastceller mest.