Design af artificiel foetor flatus ved hjælp af flygtige bakterielle produkter

RESUMÉ

INTRODUKTION: Excessiv flatus med ubehagelig lugt (foetor) kan være et stort socialt problem. Formålet med dette studie var at designe en artificiel foetor flatus ved hjælp af flygtige bakterielle produkter til brug for videre forskning i neutraliseringstiltag.

MATERIALE OG METODER: Repræsentative anaerobe bakterier, repræsenteret ved stammer fra en internationalt anerkendt kollektion, blev medtaget i studiet. Bakterierne blev inkuberet i anaerobe krukker i en anaerob atmosfære. Efter 24 timer blev låget på krukken fjernet, hvorefter foetor blev evalueret af en speciallæge i klinisk mikrobiologi.

RESULTATER: Efter de indledende undersøgelser blev fire anaerobe bakteriearter udvalgt til videre undersøgelser på baggrund af lugtkarakteristika. I alt syv kombinationer, af to og tre stammer, kunne herefter vurderes. Foetor fra kombinationen af Bacteroides fragilis ATCC 25285, Clostridium difficile ATCC 700057 og Fusobacterium necrophorum ATCC 25286 viste sig at have den mest udtalte skidne lugt og blev valgt som den endelige kombination.

KONKLUSION: Det er muligt at designe artificiel foetor flatus ved hjælp af flygtige bakterielle produkter. Metoden til fremstilling er nem og billig, og dermed er vejen banet for videre forskning i foetor flatus-neutraliseringstiltag.

FUNDING: ingen.

TRIAL REGISTRATION: ingen.

Excessiv flatus med ubehagelig lugt (foetor) kan være et stort socialt problem. Som et forsøg på at afhjælpe problemet har neutralisering af foetor flatus været forsøgt. I en dansk oversigtsartikel af Pommergaard et al i The New Zealand Medical Journal er det eksempelvis foreslået, at man kunne forsøge at putte aktivt kul i flysæder (flyrejser er kendt for at udløse større mængder flatus) eller ligefrem i underbenklæder [1, 2]. Desværre har forskning på dette felt været særdeles begrænset. Således opnås kun to hits ved søgning på »inactivation and flatus« og nul hits ved »neutralizing and flatus« eller »neutralization and flatus« på PubMed (5. juli 2016). Sådanne studier kan være vanskelige at gennemføre, dels på grund af mangel på frivillige forsøgspersoner, dels på grund af den ikkekontrollerbare parameter omkring udløsning af flatus med deraf følgende foetor, som man ønsker at neutralisere [2]. Artificiel foetor flatus er et nyt forskningsområde med store perspektiver. Udvikling af en artificiel foetor flatus vil kunne fremme forskningen, herunder neutraliseringsstudier, der vil kunne gennemføres i langt større målestok og langt hurtigere og billigere end hidtil. Hovedparten af foetor flatus kommer fra den anaerobe del af tarmfloraen [3, 4]. Andre af tarmens bakterier, specielt arter, som tilhører slægten Streptococcus, har ligefrem en behagelig aromatisk duft af blandt andet karamel [5]. Deraf følger, at man i studier af foetor flatus bør fokusere på netop de anaerobe bakterier.

Formålet med dette studie var at designe en artificiel foetor flatus ved hjælp af flygtige bakterielle produkter fra velkarakteriserede anaerobe bakteriestammer til brug for videre forskning i neutraliseringstiltag.

MATERIALE OG METODER

Følgende repræsentative anaerobe bakterier (grampositive, gramnegative, kokker og stave), repræsenteret ved stammer fra en internationalt anerkendt kollektion American Type Culture Collection (ATCC), blev medtaget i studiet: Clostridium perfringens ATCC 13124, Acidaminococcus fermentans ATCC 25085, Bacteroides fragilis ATCC 25285, Fusobacterium necrophorum ATCC 25286, Tissierella praeacuta ATCC 25539, Bacteroides vulgatus ATCC 29327, Bacteroides thetaiotaomicron ATCC 29741, Alistipes putredinis ATCC 29800, Peptostreptococcus anaerobius ATCC 27337 og Clostridium difficile ATCC 700057.

Bakterierne blev udsået enkeltvis på en agarplade designet til vækst af anaerobe bakterier (Anaerob agarplade, Statens Serum Institut Diagnostica, Hillerød). Pladerne blev inkuberet i anaerobe krukker (volumen: 2,75 l, Anoxomat, MART Microbiology, Drachten, Holland) i en anaerob atmosfære (80% N₂, 10% H₂, 10% CO₂) i 24 timer ved 37 °C. Herefter kunne foetor frigives under let overtryk på grund af opvarmningen (simuleret flatus), når låget på krukken blev fjernet (Figur 1). Foetor blev evalueret af en speciallæge i klinisk mikrobiologi med ekspertise inden for anaerobe bakterier. På baggrund af de indledende undersøgelser blev fire stammer udvalgt til videre undersøgelser. Foetor blev designet ved kombination af to henholdsvis tre af de udvalgte stammer efter deres kendte profil af flygtige produkter og under hensyntagen til, at både gramnegative og grampositive arter skulle repræsenteres. Kombinationerne blev herefter undersøgt som ovenfor beskrevet. Kombinationer, hvor både C. perfringens og F. necrophorum indgik, blev ikke undersøgt på grund af overlappende lugtkarakteristika (smørsyre).

Trial registration: ingen.

RESULTATER

Efter de indledende undersøgelser blev B. fragilis ATCC 25285, C. difficile ATCC 700057, C. perfringens ATCC 13124 og F. necrophorum ATCC 25286 udvalgt til videre undersøgelser på baggrund af lugtkarakteristika som anført i Tabel 1. I alt syv kombinationer, af to og tre stammer, kunne herefter vurderes. Foetor fra kombinationen af B. fragilis ATCC 25285, C. difficile ATCC 700057 og F. necrophorum ATCC 25286 viste sig at have en mere udtalt skiden lugt end kombinationen af B. fragilis ATCC 25285, C. difficile ATCC 700057 og C. perfringens ATCC 13124, hvorfor førstnævnte blev valgt som den endelig kombination.

DISKUSSION

Det er klart, at der er et vist subjektivt skøn i vurderingen af foetor, men paletten af de flygtige produkter, der indgår i den foreslåede kombination, vil dække det, der sædvanligvis regnes for væsentlige komponenter af en gennemsnitlig foetor flatus. Dog skal det bemærkes, at differentieringen mellem de to finalekombinationer var vanskelig. Både F. necrophorum ATCC 25286 og C. perfringens ATCC 13124 er anerkendte som betydelige smørsyredannere, men som anført er F. necrophorum ATCC 25286 klart C. perfringens ATCC 13124 overlegen, hvad angår en mere udtalt smørsyreproduktion. Metoden er dog meget fleksibel for yderligere inklusion eller udskiftning af stammer, som man måtte mene tilfører foetor yderligere karakter. Opskriften på den anførte artificielle foetor flatus kan frit anvendes uden hensyntagen til patenter eller royalties til opfinderen. Metoden til fremstilling er nem og billig og dermed er vejen banet for videre forskning i foetor flatus-neutraliseringstiltag. Der skal dog advares imod, at den samme testperson udsættes for større mængder af simuleret flatus, da dette kan medføre en vis nausea.

Korrespondance: Ulrik Stenz Justesen. E-mail: usjustesen@dadlnet.dk

Antaget: 24. august 2016.

Interessekonflikter: Forfatterens ICMJE-formular er tilgængelig sammen med artiklen på Ugeskriftet.dk