Karakteristik af megakaryopoiesen ved akut myeloid leukæmi vha. flowcytometry og RT-PCR-analyse af trombocytter og hæmatopoietiske progenitorceller

Ph.d.-afhandlingen udgår fra Hæmatologisk Afdeling, Amtssygehuset i Herlev.

Blødninger er et hovedsymptom ved akut myeloid leukæmi (AML) og kan være årsag til et dødeligt forløb af sygdommen. Ifølge hypotesen om det cellulære hierarki opstår den leukæmiske transformation i en multipotent stamcelle, som producerer kloner af leukæmiske blastceller såvel som kloner af trombocytter og erytrocytter. Tidligere studier tyder på, at blødningerne er en konsekvens af kombineret trombocytopeni og trombocytopati.

Den kliniske del af afhandlingen havde til formål at etablere en flowcytometrisk metode til analyse af trombocytfunktionen og at sammenholde resultaterne med den kliniske blødningstendens.

Den basalbiologiske del havde til formål at identificere megakaryocytforstadier i knoglemarven vha. flowcytometri og at undersøge eksistensen af leukæmispecifikt fusionstranskript i megakaryocytforstadierne.

Flowcytometristudier af 50 AML-patienter påviste mul-tiple trombocytfunktionsdefekter på diagnosetidspunktet, involverende adhæsion, aggregation og sekretion. Lav ekspression af trombocytaktiveringsmarkøren P-selektin efter in vitro-stimulation af trombocytterne med TRAP var en stærkere prædiktor for blødning på diagnosetidspunktet end lavt trombocyttal (OR 27,5 vs. OR 6,9). Tilstedeværelse af blødning på diagnosetidspunktet var en uafhængig prædiktor for grad 3-4-blødning i de næste 28 dage ved en multivariat analyse (RR=3,6; p = 0,018) og højt korreleret til ekspressionen af P-selektin. Tilstedeværelsen af leukæmispecifikt fusions-transkript blev påvist i megakaryocytforstadier og støtter hypotesen om det cellulære hierarki.

Arbejdet danner basis for videre udforskning af mekanismerne bag nedregulering af megakaryopoiesen ved AML.