Skip to main content

In vitro- og ex vivo-studier af PNA, ada-PNA og peptid-PNA-konjugater

Cand.scient. Uffe Koppelhus: Forf.s adresse: Biokemisk Afdeling B, IMBG, Panum Instituttet, Blegdamsvej 3, 2200 København N. E-mail: ukop@biobase.dk Forsvaret finder sted den 12. marts 2003, kl. 14.30, Hannover Auditoriet, Panum Instituttet, Blegdamsvej 3, København. Bedømmere: lic.scient. Finn Skou Pedersen , professor, PhD Bernard Lebleu, Frankrig, og lektor, dr.scient. Jens Høiriis Nielsen.

2. nov. 2005
2 min.

Ph.d.-afhandlingen er baseret på eksperimentelt arbejde udført henholdsvis på Biokemisk Afdeling B, Panum Instituttet, og på Afdeling for Virus og Kræft, Kræftens Bekæmpelse, Århus.

Afhandlingen omhandler en række forskellige forskningsprojekter, som primært har haft til hensigt at undersøge og udvikle peptidnukleinsyres (PNA's) potentiale som anti-HIV-1-terapeutikum. PNA er en DNA-analog som udviser høj affinitet og specificitet i bindingen af komplementær DNA og RNA, og som desuden er fuldstændig stabil i biologiske systemer. Disse egenskaber har bragt PNA i fokus inden for forskning i eksperimentel og terapeutisk genregulering ved den såkaldte »antisense«-teknik.

Det vises i afhandlingen at PNA bundet til HIV-1 gag RNA udgør en effektiv og specifik blokade af HIV-1 revers tran-skriptase-aktivitet når der testes i et cellefrit in vitro-system. Yderligere vises det, at anti-HIV-1 PNA tilsat i høje koncentrationer (>20 μM) har stor antireplikativ effekt på HIV-1 i cellekultur. En forudsætning for en fremtidig terapeutisk udnyttelse af PNA er dog at PNA's evne til at passere biologiske membraner forbedres. Afhandlingen omfatter derfor en undersøgelse af en række PNA'er modificeret med henblik på at øge det cellulære optag. Disse undersøgelser viste at mens konjugering af PNA til en lipofil gruppe (adamantyl) kun i meget ringe grad øgede PNA's cellulære optag, resulterede konjugering af PNA til såkaldte »cellepenetrerende peptider« i, at PNA blev effektivt internaliseret af de fleste testede celletyper. Det cellulære optag af disse peptid-PNA- konjugater var dog primært endocytotisk (vesikulært), og yderligere modifikationer er derfor påkrævede for at opnå en hensigtmæssig cellulær kompartmentalisering af det optagede PNA.